流式细胞术是非常让人着迷的实验——高速客观、结果稳定、具有统计学意义，能够处理复杂样本并同时获取多种参数。

今天丁香实验给大家整理了流式细胞术从「实验设计」到「结果分析」的全流程protocol，建议转发收藏！

如果你是全新新手小白，建议先看以下实验讲解视频，????点此查看流式细胞术入门视频（原理、操作、常见问题）

第一步设计你的流式细胞实验很多同学在实验设计的时候就埋下了隐患，最常见的问题就是——对照设置不合理，最后导致整体实验失败或数据不理想。流式对照至少有5种。生物学对照，空白对照，同型对照（Isotypecontrol），补偿对照（也叫单阳性对照）和FMO对照，主要目的是为了避免出现的假阳性或假阴性结果。看不懂以上对照的含义也没关系，我们以一个具体的凋亡实验来看看如何设置对照组：??点此查看对照组设置具体案例！??点此查看对照组设置具体案例！??点此查看对照组设置具体案例！第二步细胞悬液样本制备流式细胞术的分析检测建立在单个细胞的基础上，所以制备合格的单个分散的细胞悬液是非常关键的一环。对不同来源和不同形式的样品，根据各种样品的特点可选择不同的分散方法。单层培养细胞、血液、各种脱落细胞等样品标本经过简单的制备悬液，离心分离处理，就可以得到分散较好的单个细胞悬液，是理想的流式细胞术检测对象。不同组织来源的实体组织标本采用酶消化法、机械法和化学试剂处理法来分散细胞。石蜡包埋组织单细胞悬液可使大量存档的临床资料重新得到研究与利用，从而扩大了流式细胞术的应用范围。样品制备一般通过切片、脱脂、水化、消化及终止消化后过滤再收集细胞悬液，去除碎片的单细胞悬液用70％乙醇固定保存。??点此查看流式细胞样本制备protocol??点此查看流式细胞样本制备protocol??点此查看流式细胞样本制备protocol第三步流式检测操作流程实验目的不同，检测的数据也各不相同，以下是一些常用实验方法，建议收藏：??流式细胞仪检测细胞周期??流式细胞法检测细胞凋亡??流式细胞仪检测细胞内因子??用流式细胞术检测血小板相关抗体??用流式细胞术计数网织血小板很多同学第一次操作流式细胞仪器的时候非常紧张，生怕哪一步做错，弄坏了上百万的实验设备。仪器的操作确实有很多讲究，比如：「检查供液槽和废液槽：供液槽应含足够的仪器缓冲液，废液槽应在上次使用后清洗干净。」「使用后的清洗所有样品测定完后，要进行仪器的清洗。」流式细胞仪器使用方法和流程已帮大家做好梳理：??点此查看流式细胞仪使用操作??点此查看流式细胞仪使用操作??点此查看流式细胞仪使用操作第四步流式检测结果分析实验结果图通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种。由数据还可以做出标准曲线进行定量分析。不过很多新同学很难读懂图片代表的含义。想要了解「Gate」和「Regin」？流式图中的阴/阳（N/P）如何划分?坐标轴的意义？二维图怎么看？等等问题。??一起看看流式细胞解读指导吧。以上就是流式细胞实验设计、操作指南指导合集，如果你是实验小白可以收藏、转发文章，在做实验的时候按照流程一步步操作。如果你是师兄师姐，也可以把本篇文章分享给师弟师妹们！

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