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来源:临床质谱网、网络

我们都知道质谱联用系统具有很好的灵敏度和高选择性，最初，有专家学者尝试将未经前处理的生物样本直接进入系统检测，但是经过大量实践发现，除了极少数情况下只需将样品进行简单处理就可以直接检测外，大部分都需要采取分离、净化、浓缩、衍生等前处理步骤，才能实现稳定、准确检测目标物的目的。样品前处理目前是临床质谱分析的一个难点和重点，成为质谱快速分析的瓶颈。

蛋白沉淀的定义

沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。蛋白质从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。

蛋白沉淀前处理的优势与劣势

优势：蛋白沉淀的最主要的优势就是操作简便、成本低、易于实施。

劣势：此方法仅去除了蛋白质，内源性杂质并没有去除掉，长时间检测可能会对色谱柱和仪器的寿命产生影响。所以，要对色谱柱和仪器做定期维护。

处理后的样本浓度会被稀释，不适用于浓度低的目标物和质谱响应偏低的情况。

临床质谱领域蛋白沉淀方法汇总

1.有机溶剂沉淀法

此方法为临床质谱领域最常用方法，一般沉淀试剂以甲醇、乙醇、乙腈为主。个别项目会在有机溶剂中加入一定量的有机酸来提高沉淀效率。例如同型半胱氨酸的检测，一般会在有机溶剂中加入一定量的三氟乙酸或者三氯乙酸。在做血浆或血清样品时，多用甲醇或乙腈沉淀蛋白，一般情况样本与沉淀剂的比例为乙腈最低1:2（一般1:3以上），甲醇最低1:3（一般1:5以上），有实验显示以血清：水：乙腈比例为1:2:4.5时去除效果最好。

适用目标物：生物小分子、糖类。

原理：有机溶剂的沉淀原理是降低水的介电常数，导致具有表面水层的生物大分子脱水，相互聚集，最后析出。

优点：

a)分辨能力比盐析法高，即蛋白质只在一个比较窄的有机浓度下沉淀；

b)沉淀后不用需考虑除盐，过滤较为容易。

2.盐析法

当目标物为非蛋白质时，纯盐析法在临床质谱领域应用较少，因为沉淀后会引入高浓度盐，长时间进样的话会对仪器灵敏度和柱压产生影响。所以，一般使用盐析法沉淀后，样本还需经过稀释、减少进样量或者透析除盐等步骤。盐析法可与其他沉淀方法结合使用。

适用目标物：盐析法沉淀出的蛋白并没有失活，所以主要用于蛋白质和酶的提取。

3.加热凝固法

原理：将接近于等电点附近的蛋白质溶液加热,可使蛋白质发生凝固(coagulation)而沉淀。加热首先是加热使蛋白质变性,有规则的肽链结构被打开呈松散状不规则的结构,分子的不对称性增加,疏水基团暴露,进而凝聚成凝胶状的蛋白块如煮熟的鸡蛋,蛋黄和蛋清都凝固。此方法主要选择性去除不耐热的杂蛋白。

适用目标物：目标物需要有较强的热稳定性，例如葡萄糖。

其余的蛋白沉淀法还有等电点沉淀法、非离子多聚物沉淀法、生成盐复合物沉淀法等，这些方法临床质谱领域应用较少目前常见的临床质谱项目中应用蛋白沉淀作为前处理的有药物检测（极大多数）、同型半胱氨酸、甲状腺激素、葡萄糖、水溶性维生素等。样本前处理系统生产厂家及产品主要有

南芯芯仪(广州)制造有限公司

全自动LC-MS/MS样本前处理系统MS

MS全自动样本前处理系统集成度高、灵活度高，能高效完成96例样本2个不同项目的处理，配备触控一体化操作界面，专用的图形化用户界面，可自由编辑处理程序，可从所有常用的LC-MS/MS系统（ABSciex、Waters、Thermo、安捷伦和岛津）生成输入列表，为临床质谱检测提供完整解决方案，实现质谱样本处理的自动化和标准化操作。

a)正压氮吹装置；

b)扫描系统，德国进口，几秒钟完成条形码识别，支持多种编码格式，支持采血管上样

c)移液装置，搭载四通道移液器，提高效率，高精度，可独立编程并进行控制，灵活使用试剂槽、试管和板

d)灵活性，兼容不同规格的萃取柱和萃取板，萃取流程可编程，满足不同的应用场景。

e)兼容性，兼容市面上各种型号的质谱

f)安全性，全封闭的工作空间，内设独立排气系统，防止有机溶剂外溢

g)独立性，全程无人值守，独立完成代谢提取全过程

h)标准化，高度再现性，高度一致性，减少人为误差

全自动微生物质谱样本前处理系统：MCMC为MALDI-TOFMS样本的前处理提供完整的自动化解决方案。MC可对平板培养的微生物菌落以及溶解后的菌悬液实现全自动化样本前处理操作，完美解决了产品自动化程度低、手工操作稳定性差、结果重复性差的问题。以机器取代人工，为使用者提供流畅的操作体验，解放宝贵的人力资源。并实现操作的标准化、提高细菌有效分离率。做您身边的临床质谱检测好帮手。

深圳市元秦生物科技有限公司

产品特点

a)完全自主研发，独特加样技术，加样/离心/混匀/稀释/孵育/氮吹

b)一站式解决样本前处理问题

c)可根据自身情况合理安排项目调度

d)高度自动化的移液平台

e)高精密的加样针和机械抓手实现全自动步骤

f)可直接穿刺真空样本管取样，避免开盖引入的污染

g)带液面探测感应，上清液直接进样到质谱安全智能的液相串联质谱

h)所有检测步骤在样本和试剂闭管的情况下完成，没有溶剂交叉污染和危害健康的问题

北京奥美泰克科技发展有限公司

LH-多功能液体处理工作站

产品特点

精确可靠的移液，值得信赖

a)三维机械臂精确定位，精度达0.1mm

b)软件内置多种吸排液方法，可控的吸排液速度，满足各种应用场景

c)根据不同液体粘稠度，调整LiquidClass值，达到精确的吸排液体积

d)移液精密度：1μLCV≤5%

丰富的移液头组库，自动切换，轻松运行

a)根据不同的移液体积和样本通量，可选择单通道、4通道、8通道、16通道、32通道移液头，移液范围为0.5μL-1mL

b)移液头和抓手采用统一的头部结构，通过软件控制，精准定位，实现机械臂自动装载和卸载

强大的整合能力

a)可整合不同的功能模块，满足不同的应用需求

b)可整合定制开发模块或第三方功能模块

浙江佰辰医疗科技有限公司

免疫质谱前处理平台iMS-

哈美顿(上海)实验器材有限公司

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浙江禾谱检测技术有限公司

禾谱检测研发的质谱自动化前处理设备以FreedomEvo高精密自动移液平台（1）为基础，包含推入式条码扫描仪（2）、高性能振荡混匀器（3）、全自动氮吹模块（4）、全自动SPE模块（5）、全自动离心机（6）等。

北京欧迪创新生物技术有限公司

产品特点(直连质谱的前处理系统)

全自动高通量WalkAway的临床分析仪

全自动高通量WalkAway的临床分析仪

Multitasker使质谱仪成为真正的WalkAway系统，全球的直连质谱系统

大大提高检测速度：检测维生素D2/D3，可1.7分钟/测试内完成（含前处理、色谱、质谱时间）

其它自动加样设备+LC-MS/MS检测维生素D2/D3，96测试需要-分钟完成

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b)全自动样本制备，包括震荡混匀、蛋白沉淀、SPE等，全程无需人工介入

c)清洗站可清洗加样针内外壁并吹干，避免交叉污染

兼容多种样本前处理方法，充分消除干扰物质

a)蛋白沉淀法PPT

b)液液萃取法LLE

c)固相萃取法SPE

符合CE-IVD临床样本检测的流程

a)高速离心模块，可精准定位，实现全自动样本处理b)可混匀全血，震荡模块完全模拟手工检测流程c)样本和试剂条码扫描，减少人为错误d)灵活的超高效液相UHPLC和在线SPE模块e)两组UHPLC超高效液相泵，psi可兼容各种方法f)通过切换阀可搭配出不同的浓度梯度流动相，适用多种检测g)在线SPE固相萃取，可浓缩、纯化目标物，并反向冲洗残留物，有效加速检测h)TTL连接并触发质谱仪检测

AutomassTurbo软件

a)图形界面，简单易用

b)可自定义方法

c)可连接LIS实验室信息系统

山东英盛生物技术有限公司

质谱自动前处理平台MSLET系列

英盛MSLET系列自动化液体处理工作站使用空气置换和独特的CO-RE系统。这些创新为MSLET系列液体处理工作站提供了无可比拟的性能，使其最大程度的保护样品的完整性，保证实验流程中所有步骤的全程追踪。为达到最大程度的安全性，MSLET系列自动化液体处理工作站能够完全控制样品加载、识别到处理等环节，并采取积极主动的错误处理方式。

产品特点

a)自动进样系统

b)通过载架将样本自动加载到系统的移液区,并且通过条码阅读确定样品的正确位置,以确保试验程序的准确性。

c)自动化通道校验

d)这套程序无需人工介入，能够自动完成移液体积校验，气密性测试以及移液通道与吸头、钢针或抓手等部件的精确匹配。它可在系统空闲时自动运行。

e)CO-RE技术CO-REPerfectTouch系统利用稳固的锁匙原理将一次性吸头固定在移液通道上。该系统在拾取和丢弃吸头的过程中不需要在垂直方向施加力度，从而提高整套系统的性能，并实现多功能化和模块化。

f)STARwatch诊断STARwatch能连续监控仪器的状态。自动分析捕捉到的数据，当发现某个硬件较频繁出现某些错误时，它将提示用户和工程师，及时进行主动干预，采取预防性措施。

g)多功能载架系统载架底板可灵活地固定众多不同模块用于放置常见的实验室器皿：微孔板，深孔板，过滤板，收集板或吸头堆叠架等，最大程度减少载架面积，提高空间利用率。

h)吸头类型识别高分辨率工业CCD相机可在整个台面区域内移动。系统自动地识别台面上一次性吸头的类型，从而避免在移液过程中的机械碰撞以及吸头类型与实验不匹配等情况。

YS-全自动多功能样本前处理系统英盛YS-是一款全新的为专业人员推出的功能强大、简单易用的质谱全自动样品前处理系统，支持固相萃取(SPE)、固相支撑液液萃取(SLE)、除磷脂(PLD)和蛋白沉淀(PPT)的自动化，兼容96孔板，紧凑的八通道自动化仪器，快速、灵活和以用户为中心的设计，结合应用方案以及一系列创新的样品前处理耗材，为分析实验室样品前处理提供理想解决方案。独特的双模式设计(96孔板或者小柱)是分析实验室的最佳选择，为您提供更多选择。深圳鸣基医疗科技有限公司

产品特点

该系统支持采血管直接上机，高度整合了扫码，移液，震荡及正压功能，配液范围5-ul，模块化设计，灵活支持流水拓展作业，支持气泡和血凝块检测，可实现样本从采血管到上机全流程全自动处理。同时支持维生素A/D/E,儿茶酚胺，免疫抑制剂5种试剂。支持蛋白沉淀和固相萃取两种处理方法。单个96孔板处理时间小于分钟；支持1-96内任意试管数的上样。

上海析维医疗科技有限公司

析维GuYü临床质谱全自动前处理解决方案

产品特点

a)11块槽位工作台，功能模块（加热/磁力/涡流/HEPA）自由搭配组合

b)3种单通道移液器，2种8通道移液器

c)兼容多种规格的离心管、微孔板、深孔板、储液器和适配器

d)前处理全流程自动化

e)功能覆盖实现

f)快速准确

g)零门槛软件操作

h)体积小，省空间，可置于通风橱内

烟台澳斯邦生物工程有限公司

AutoMas质谱分析前处理工作站

a)可实现全自动样本前处理，包括液体处理、离心、复溶、过滤、氮吹等；

b)适用0.5~50mL多种标准规格样本试管；

c)兼容市场常见的磁珠法、硅膜法样本核酸提取；

d)完整的样本处理过程监控信息（包括试剂耗材信息）；

e)全中文操作和提示界面，兼容样本灵活性和高通量。

设备概述

质谱分析样本前处理工作站能自动完成质谱分析样本前处理过程所需要的各种工作，由8个独立面板控制的加样通道和台面上各种特殊的功能模块配合完成。功能模块主要由：转板机械手、自动微板离心机、震荡孵育器和其他必要的样本载架，耗材载架以及各种型号的试剂槽。可实现样本自动处理过程中必须的液体处理、离心沉淀、过滤除脂、氮吹干燥、定量复溶等实现步骤。应用方向：LC-MS固相萃取/蛋白质沉淀萃取（PPE），滥用药物、维生素D、毒理、激素

深圳逗点医疗科技有限公司

产品特点

a)精准加样分液：自动液面探测，一次吸液连续分液，从5μL至1mL，可移取中间任何体积。

b)功能强大，易于整合：特有的开发式设计使其不仅可单机使用，亦可整合多种逗点生物自动化或第三方仪器，组成功能强大、运行高效的自动化系统工作站。

c)多种分液种类，有效隔离污染源，保证操作人员的安全。

d)设计紧凑，维护简单。

应用：

核酸纯化、基因组蛋白质组测序、克隆快速筛选、细胞培养、生物芯片样品制备、临床质谱样本前处理。

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