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翻译：美国鲁沃夫（华夏）培训中间翻译组

SíntiadeSouzaEvangelista，理科硕士，巴西米纳斯吉拉斯联邦大学看护学院根底看护系

NataliaRochaGuimaraes，理科硕士，巴西米纳斯吉拉斯联邦大弟子物科学探索所微生物学系?

关键词：生物膜，手术器材，洗刷，患者平安，调理器材再处置

生物膜去除是手术器材处置进程中的一个挑战。孕育生物膜的微生物有不少，此中就有表皮葡萄球菌，这是一种凝集酶阴性葡萄球菌，是人体皮肤和粘膜的常居菌，病院一种紧要的机缘性病原体，能够习染特定大众（末年人、免疫受损全体）及部份有留置或植入性调理器材的患者。

临床上缺乏时刻肯定生物膜组织的办法，是以微生物在手术器材表面初始附着到生物膜孕育之间的时候难以晓得，CSSD罕用的避让生物膜孕育及去除已孕育生物膜的洗刷办法的灵验性也不精确。本探索咱们解析了表皮葡萄球菌来往手术器材到孕育生物膜所需的时候，以及怎么运用手工和主动洗刷办法去除生物膜。

办法

熟练运用的是新止血钳。用非常的不锈钢切割刀片将止血钳分为棘齿、手柄和钳端片断（每段约1cm）。抉择这三个部位是由于有不法则和滑腻表面给洗刷进程带来了不同挑战。为保证无菌，这些片断用超声洗刷机处置10分钟，用SMS无纺布包装后通过饱和压力蒸汽灭菌，为后续的受控混浊做谋划。

在II级生物平安柜中将止血钳片断淹没在5mL含CFU/ml表皮葡萄球菌的胰卵白酶大豆肉汤（TSB）的小瓶中1、2、4、6、8、12小时，温度为37°C，期间放在rpm的定轨振动器不断混匀。屡屡培育时候完毕后，用移液管去除培育基，用3mL无菌蒸馏水漂洗片断，去除未附着的悬浮菌。用无菌镊子掏出片断，分为3组。

1.混浊（阳性对比）：审查片断，后续无操纵，考证表皮葡萄球菌是不是附着及生物膜是不是孕育。

2.手工洗刷：浸入5mL制备好的多酶洗刷剂中，再变化到无菌培育皿上，用非常的柔弱毛刷刷5次。

3.主动洗刷：将片断放入含5mL多酶洗刷剂溶液的无菌小瓶中，放入超声洗刷机停止主动洗刷，温度40°C，处置10分钟。?

手工洗刷和主动洗刷后的片断变化到含5mL无菌蒸馏水的小瓶中，摇10秒做为漂洗，尔后放在无菌吸水纸上排出有余的水。

混浊后及手工/主动洗刷后的细胞停止微生物培育。细菌附着及生物膜孕育由扫描电子显微镜（SEM）肯定。SEM解析中介入2个棘齿片断做为对比，证实纯TSB和多酶洗刷剂是不是有残留混浊。?

效果

淹没不同时候后，百般型片断的微生物负荷均随时候增进（1小时后-CFU/cm2；12小时后CFU/cm2）。手工洗刷和主动洗刷后微生物负荷别离削减了1-2log10和1-3log10，不过生物膜尚未统统去除。总的来讲，手柄的微生物负荷量较低，6小通常不同显著。

SEM为混浊后表皮葡萄球菌的附着供给了直接凭证。图1A-B为仅来往TSB或多酶洗刷剂溶液5分钟的片断。1小时后，附着的表皮葡萄球菌在棘齿地域浮现多层（图1C）。闭口片断淹没2小时后及钳柄片断淹没4小时后察看到EPS孕育（图1D-E）。6小通常，闭口片断的表面成长召集成单层（图1F）。8小通常，棘齿地域的细菌数目及EPS面积增添显著（图1G）。12小通常，闭口片断的EPS厚度增添（图1H）。

图1.手术器材走漏于表皮葡萄球菌不同时候后表面的扫描电子显微镜。

各片断走漏于表皮葡萄球菌后及手工/主动洗刷后的均匀细菌负荷如图2所示。不同至极显著。手工洗刷后细菌负荷削减1-2log10，主动洗刷后削减1-3log10。

图2.手工/主动洗刷后止血钳片断成长的均匀微生物负荷（CFU/cm2）?

商议

本探索有限制性。微生物附着是时候影响的进程不过也受其余成分的影响，是以咱们能够在统一个界限内肯定附着进程的不同阶段。另外，受制于SEM的视线，咱们无奈通过SEM察看到器材的全面表面，是以咱们大概会遗漏一些存在的活菌。在目下的探索中，咱们只测试了一种微生物。在现实情形下，多半生物膜是由多种细菌孕育的。?

论断

细菌来往手术器材后会附着并最后孕育生物膜，这是一个繁杂的进程。该进程会致使微生物负荷的增添和两小时后胞外围拢物的渗出。从这个意义上讲，在预洗刷时选用保举的办法囊括维持器材润泽以及运用后当行将器材送至洗刷是很紧要的。

比拟手工洗刷，主动洗刷能削减更多的生物负荷，再处置调理设置时影响更强。但是，手工洗刷后发掘的细胞以及器材表面发掘的生物膜证实了初始附着阶段后，细菌曾经紧紧附着在器材表面，两种洗刷办法都出毛病，无奈统统去除生物膜。是以，手术器材大概是微生物的贮菌库，独特是有孔洞或沟痕的器材。另外，咱们还需处置洗刷过程中面对的不同挑战，纵然运用一种器材时也要思量到该器材不同部位的洗刷成绩。?

--译自AJIC.3

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